Antiporter-like protein subunits of respiratory chain complex I

Sammanfattning: Popular Abstract in Swedish Alla celler behöver energi och de skaffar den på olika sätt, t. ex. från oxidering av mat eller från solljus. Adenosin trifosfat (ATP), som kallas för cellens energivaluta, kan dock inte syntetiseras direkt från mat eller ljus. Nästan alla organismer utnyttjar proteinkomplex i form av en andningskedja som sitter i membranet för att alstra en proton potential. Det kan liknas vid potentialen i batterier och genom att ladda ur batteriet erhålls det energi i form av ATP. Bakterier har andningskedjan sittandes i sitt inre membran, medan högre organismer har den i mitokondriernas membran. Dessa kallas därför för cellens kraftverk. Det största komplexet i andningskedjan är NADH:ubikinon oxidoreduktas, som också kallas för Komplex I. Det orsakar utveckling av neurodegenerativa sjukdomar som Alzheimers och Parkinsons, och även vanligt åldrande. Komplex I består av en ganska okänd del som sitter i membranet och en annan, men välkarakteriserad vattenlöslig del som sticker ut från membranen. Syftet med vårt projekt är att få reda på hur Komplex I alstrar membranpotential, dvs. hur det katalyserar protonpumpning över membranet och om det kanske pumpar någon annan jon, t.ex. natrium. Vi har undersökt detta med två metoder. Kärnmagnetisk resonans spectroskopi (NMR) kan detektera natrium joner och kan användas för att bestämma om och hur ett protein binder natrium. Man kan också sätta in proteiner i en liposom och pH mätning kan besvara frågan om hur protoner förs över membran. Först utvecklade vi en metod för att producera stora mängder av komplex I:s subenheter, och sedan använde vi oss av de två metoder som nämndes tidigare.